Питательные среды для энтерококков

Рецепт 82. Азидно-глюкозный бульон для выделения энтерококков. Основа среды: к 1 дм3 мясопептонного бульона добавляют 5 г пептона, 7,5 г глюкозы, 2,5 г натрия хлорида, составные части растворяют нагреванием. После этого охлаждают и устанавливают pH таким образом, чтобы после стерилизации он составлял при 25 °С 7,2(±0,1). Затем основу среды стерилизуют текучим паром при 100°С в течение 30 мин. К основе среды, охлажденной до 50°С, добавляют 2 см3 раствора натрия азида и 2 см3 спиртового раствора бромкрезолового пурпурного массовой концентрацией 16 г/дм3.

Готовую среду не стерилизуют. Хранят среду, защищая от света и высыхания, при 4(±2) °С не более 3 мес. Непосредственно перед использованием ее разливают по 5 см3 в стерильные пробирки.

Раствор натрия азида: 10 г натрия азида переносят в мерную колбу вместимостью 100 см3, растворяют при легком подогревании в дистиллированной воде и доливают раствор до метки. Раствор готовят под вытяжкой, так как пары азида натрия ядовиты.

Рецепт 83. Щелочная полимиксиновая среда для выделения энтерококков. Основа среды: к 400 см3 мясопептонного бульона добавляют 10 г глюкозы, 5 г натрия хлорида, 10 см3 дрожжевого экстракта. Основу среды стерилизуют в автоклаве при 110(±1)°С в течение 12 мин, охлаждают и добавляют 250 см3 раствора натрия карбоната массовой концентрацией 21,2 г/дм3 и 250 см3 раствора натрия бикарбоната массовой концентрацией 10 г/дм3. Устанавливают pH таким образом, чтобы он составлял при 25 °С 10,1(±0,1). После этого к среде добавляют 200000 ЕД полимиксин М сульфата, 5 см3 спиртового раствора бромтимолового синего массовой концентрацией 16 г/дм3. Среду хранят, защищая от света и высыхания, при 4(±2)°С не более 7 сут. Непосредственно перед использованием ее разливают по 5 см3 в стерильные пробирки.

Рецепт 84. Селективный агар по Сланецу и Бертли для выделения энтерококков. 20 г пептона, 25 см3 дрожжевого экстракта, 2 г глюкозы, 4 г калия фосфорнокислого двузамещенного, 15(±3) г агар-агара помещают в мерную колбу вместимостью 1000 см3, доливают дистиллированной водой до метки, нагревают до растворения компонентов. Охлаждают, устанавливают pH таким образом, чтобы после стерилизации он составлял при 25 °С 7,2(±0,1). Стерилизуют текучим паром при 100°С в течение 30 мин, охлаждают до 50 °С. Добавляют 4 см3 раствора азида натрия и 10 см3 раствора 2-, 3-, 5-трифенилтетразолий хлорида, хорошо перемешивают и разливают по стерильным чашкам Петри. Среду хранят, защищая от света и высыхания, при 4(±2)°С не более 7 сут.

Раствор натрия азида: 10 г натрия азида переносят в мерную колбу вместимостью 100 см3, растворяют при легком подогревании в дистиллированной воде и доливают раствор до метки. Раствор готовят под вытяжкой, так как пары азида натрия ядовиты.

Раствор 2-, 3-, 5-трифенилтетразолий хлорида (ТТХ): 1 г ТТХ переносят, смывая дистиллированной водой, в мерную колбу вместимостью 100 см3, доводят объем дистиллированной водой до метки. Раствор стерилизуют методом мембранной фильтрации. Хранят в темной плотно закрытой посуде при 4(±2)°С не более 3 мес.

Рецепт 85. Канамицин-азидно-эскулиновый агар (КАЭ-агар) для выделения энтерококков. 20 г пептона из казеина, 25 см3 дрожжевого экстракта, 5 г натрия хлорида, 1 г натрия лимонно-кислого, 0,5 г железа (III) аммоноя гидроцитрата, 1 г эскулина, 15(±3) г агар-агара помещают в мерную колбу вместимостью 1000 см3, доливают дистиллированной водой до метки, нагревают до растворения компонентов. Охлаждают, устанавливают pH таким образом, чтобы после стерилизации он составлял при 25°С 7,1 (±0,1). Среду стерилизуют в автоклаве при 121(±1)°С в течение 15 мин, охлаждают до 50 °С. Добавляют 1,5 см3 раствора азида натрия и 0,4 см3 раствора канамицина сульфата массовой концентрацией 50 г/дм3 или 0,2 см3 рас твора канамицина сульфата массовой концентрацией 100 г/дм3 и разливают по стерильным чашкам Петри. Хранят при 4(±2)°С не более 7 сут.

Раствор натрия азида: 10 г натрия азида переносят в мерную колбу вместимостью 100 см3, растворяют при легком подогревании в дистиллированной воде и доливают раствор до метки. Раствор готовят под вытяжкой, так как пары азида натрия ядовиты.

Рецепт 86. Молочно-ингибиторная среда (МИС) для выделения энтерококков. К 850 см3 стерильного расплавленного и охлажденного до 50 °С мясопептонного агара добавляют 150 см3 обезжиренного молока, 12,5 см3 водного раствора кристаллического фиолетового массовой концентрацией 0,1 г/дм3, 10 см3 раствора калия теллурита, массовой концентрацией 20 г/дм3, 200000 ЕД полимиксина М сульфата. Готовую среду не стерилизуют и разливают в стерильные чашки Петри. Хранят при 4(+2) °С не более 10 сут.

Вместо раствора калия теллурита можно добавлять в среду 5 см3 раствора ТТХ, приготовленного, как описано в рецепте селективного агара по Сланецу и Бертли.

Рецепт 87. Глюкозотриптозный бульон с дрожжевым экстрактом (pH 7,2 и 9,6). 5 г триптона или ферментативного гидролизата казеина, 12,5 см3 дрожжевого экстракта, 1 г глюкозы добавляют к 1 дм3 дистиллированной воды. Смесь, периодически помешивая, подогревают до полного растворения всех компонентов, охлаждают и устанавливают pH таким образом, чтобы после стерилизации он составлял при 25 °С 7,2(±0,1) (или 9,6±0,1).

Среду разливают по 5 см3 в пробирки и стерилизуют в автоклаве при 121 (± 1) °С в течение 15 мин. Хранят при 4(±2) °С не более 14 сут.

Рецепт 88. Глюкозотриптозный агар с дрожжевым экстрактом (pH 7,2). Готовят так же, как глюкозотриптозный бульон с дрожжевым экстрактом (pH 7,2), но при приготовлении добавляют на 1 дм3 среды 15(±3) г агар-агара.

Рецепт 89. Солевой бульон для выявления способности энтерококков расти при высоком содержании хлорида натрия. Основа среды: глюкозотриптозный бульон с дрожжевым экстрактом (pH 7,2). В 1 дм3 основы среды растворяют при нагревании на водяной бане 65 г хлорида натрия. Среду разливают по 5 см3 в пробирки и стерилизуют в автоклаве при 121(±1)°С в течение 15 мин. Хранят при 4(±2)°С не более 1 мес.

Рецепт 90. 40% желчный бульон для выявления способности энтерококков расти при высоком содержании желчи. Основа среды: глюкозотриптозный бульон с дрожжевым экстрактом (pH 7,2). К 600 см3 стерильной охлажденной до 45-50 °С основы среды асептически добавляют 400 см3 стерильной профильтрованной желчи крупного рогатого скота или эквивалентное количество сухой желчи. Хранят при 4(±2)°С не более 3 месяцев.

- Читать далее "Питательные среды для протеев"

Редактор: Искандер Милевски. Дата публикации: 31.10.2019

Остались вопросы или замечания?

Все размещенные статьи преследуют образовательную цель и предназначены для лиц имеющих базовые знания в области медицины.
Без консультации лечащего врача нельзя применять на практике любой изложенный в статье факт.
Жалобы и возникшие вопросы просим присылать на адрес statii@dommedika.com
На этот же адрес ждем запросы на координаты авторов статей - быстро их предоставим.