Рецепт 125. Пептонная вода (основной 10% раствор) для галофильных вибрионов. Пептона—100 г, хлорида натрия — 50 г, нитрата калия — 1 г, карбоната натрия—25 г, дистиллированной воды 1 л (pH 9,0). Смесь пептона с хлоридом и карбонатом натрия растирают в ступке, после чего растворяют в дистиллированной воде при кипячении, а затем прибавляют нитрат калия. Раствор фильтруют и стерилизуют в автоклаве при 121(±1)°С в течение 20 мин. Основной раствор пептона может храниться до 6 мес. Для получения 1% пептонной воды основной раствор разводят в 10 раз и т.д.

Рецепт 126. Щелочная 0,1% пептонная вода с 3% хлорида натрия для определения присутствия/отсутствия галофильных вибрионов. Пептон—1 г, натрия хлорид—30 г, вода дистиллированная—1 дм³. Все компоненты смешивают и кипятят до полного растворения, охлаждают до комнатной температуры и устанавливают pH 7,8-8,2. Среду разливают по 225 см³ во флаконы и по 10 см³ в пробирки, затем стерилизуют в автоклаве при 121(±1)°С в течение 20 мин.

Рецепт 127. Щелочная 1% пептонная вода, содержащая 0,3,8 и 10% хлорида натрия для проведения теста на галофильность при учете галофильных вибрионов. В 1% пептонную воду добавляют требуемое количество хлорида натрия, при помощи 10% раствора NaOH устанавливают pH 8,0. Среду фильтруют, разливают в пробирки по 5 см³ и стерилизуют в автоклаве при 121(±1) °С в течение 30 мин.

Рецепт 128. Щелочная пептонная вода с триптофаном для определения индола при учете галофильных вибрионов. К 1% пептонной воде, содержащей 3% хлорида натрия (pH 8,0), добавляют 0,03% триптофана.

Рецепт 129. Жидкая среда обогащения для накопления галофильных вибрионов. К 100 см³ стерильной 1% пептонной воды, содержащей 3% хлорида натрия (pH 8,0), добавляют 0,2% жидкости «Прогресс» и 0,75 см³ рабочего разведения (1:1000) теллурита калия. При использовании готового 2% раствора теллурита калия для получения рабочего разведения к 5 см³ 2% раствора добавляют дистиллированную воду до 100 см³. Теллурит калия (К₂ТеO₃*Н₂O) вносят в среду непосредственно перед употреблением. Серии теллурита калия должны быть предварительно проверены и оттитрованы на культуре Vibrio parahaemolyticus на отсутствие ингибиторного действия по отношению к вибриону. Срок хранения среды не более 48 ч.

Рецепт 130. Среда ДДА (дифференциально-диагностический агар) для выделения галофилъных вибрионов. В 1 дм³ расплавленного стерильного рыбо- или мясопептонного щелочного (pH 8,0) 2% агара, охлажденного до 50 °С, растворяют 70 г натрия хлорида, 15 г сахарозы, 2 см³ жидкости «Прогресс», 5000 ЕД пенициллина, 10 см³ 1,6% спиртового раствора бромтимолового синего и 7,5 см³ раствора теллурита калия (1:1000). Не стерилизуя, среду разливают в стерильные чашки Петри. Среда имеет темный сине-зеленый цвет. Срок хранения в холодильнике—7-10 сут.

Рецепт 131. Щелочной агар с 3% хлорида натрия (ЩРПА) для галофилъных вибрионов. К 1 дм³ рыбо- или мясопептонного агара добавляют 30 г хлорида натрия и 30 см³ 10% раствора карбоната натрия, кипятят 45 мин, фильтруют через ватно-марлевый фильтр. Стерилизуют в автоклаве при 121 (±1) °С в течение 20 мин. Среда должна иметь pH 7,8-8,0. Срок хранения — 3 мес. в холодильнике.

Щелочной агар выпускают в сухом виде. Способ приготовления указан на этикетке.

Рецепт 132. Полужидкий агар с 3% хлорида натрия для галофильных вибрионов. В 1 дм³ рыбо- или мясопептонного бульона растворяют при нагревании 50 г хлорида натрия и 2,5 г агар-агара. При помощи 10% раствора карбоната натрия доводят pH до 8,0. Среду фильтруют через ватно-марлевый фильтр, разливают в пробирки по 5 см³. Стерилизуют в автоклаве при 121 (± 1) °С в течение 30 мин.

Рецепт 133. Среда ДАГВ для выявления декарбоксилазной активности галофилъных вибрионов. Пептон — 5 г, натрия хлорид—30 г, глюкоза—0,5 г (или 1 см³ 40% раствора), витамин В₆ (5% раствор) — 0,1 см³, бромкрезолпурпур (1,6% спиртовой раствор) — 1 см³, вода дистиллированная — 1 дм³. pH среды 7,8. Готовят среду и разливают ее в 2 флакона. В один добавляют 1% L-лизина, второй флакон со средой без лизина служит контролем. Готовую среду разливают в пробирки по 2 см³ и стерилизуют в автоклаве при 121(±1)°С в течение 15 мин.

Рецепт 134. Среда Кларка с 3% хлорида натрия для галофилъных вибрионов. Пептон — 5 г, натрия хлорид—30 г, глюкоза — 5 г, калий фосфорнокислый двузамещенный (К₂НРO₄)— 5 г. Растворяют все компоненты в 900 см³ дистиллированной воды, доводят объем до 1 дм³, фильтруют. Устанавливают pH 7,5-7,8 и разливают в пробирки по 5 см³. Стерилизуют в автоклаве при 112,5(±1)°С в течение 15 мин.

Рецепт 135. Среда Хъю-Лейфсона для галофилъных вибрионов. Пептон — 2 г, натрия хлорид — 30 г, глюкоза — 10 г, калий фосфорнокислый двузамещенный (К₂НРO₄) — 0,3 г, бромтимоловый синий 1% водный раствор — 3 см³, агар-агар — 3 г, вода дистиллированная — 1 дм³. Готовят среду, устанавливают pH 8,0 и разливают в пробирки по 3 и 10 см³. Стерилизуют в автоклаве при 112,5(±1)°С в течение 20 мин.

- Читать далее "Питательные среды для бактериологического исследования фармацевтических препаратов"

Редактор: Искандер Милевски. Дата публикации: 31.10.2019