Рецепт 91. Жидкая селективная среда с полимиксином для выделения Proteus. Основа среды: к 1 дм³ мясопептонного бульона добавляют 1 г маннита, 50 см³ натуральной бычьей желчи или эквивалентное количество сухой желчи, 0,8 г калия фосфорно-кислого двузамещенного, 2 см³ водного раствора кристаллического фиолетового (концентрацией 1 г/дм³), 2 см³ спиртового раствора бромтимолового синего (концентрацией 16 г/дм³). Устанавливают pH таким образом, чтобы после стерилизации он составлял при 25 °С 6,9(±0,1). Основу стерилизуют текучим паром при 100 °С в течение 15 мин.

Для приготовления среды к основе асептически добавляют 10 см³ раствора мочевины (концентрацией 500 г/дм³) и 100000 ЕД полимиксина В сульфата или 120000 ЕД полимиксина М сульфата. Готовую среду разливают по 5 см³ в стерильные пробирки и хранят при 4(±2) °С не более 7 сут. Готовая среда прозрачная желто-бурого цвета.

Рецепт 92. Агар дезоксихолат-цитрат-лактозный (по Leifson, модификация Hynes) для выделения Proteus. Основа среды: в 1 дм³ кипящей мясной воды растворяют 5 г пептона, 10 г лактозы, 22,5 г агара, охлаждают до 45-50 °С. Устанавливают pH таким образом, чтобы после стерилизации он составлял при 25 °С 7,4(±0,1). Прибавляют 0,03 г нейтрального красного, разливают в мерные колбы и стерилизуют в автоклаве при 115(±1) °С в течение 20 мин. Основу хранят при 4(±2) °С не более 7 сут.

Для приготовления среды к расплавленной и охлажденной до 45-50 °С основе прибавляют (из расчета на 100 см³ основы) 5 см³ раствора солей и 5 см³ раствора дезоксихолата натрия. Среду тщательно перемешивают и разливают по стерильным чашкам Петри. Используют среду в день ее приготовления.

Раствор солей: 17 г натрия лимонно-кислого, 1 г натрия тиосульфата, 2 г железа (III) цитрата помещают в мерную колбу вместимостью 100 см³ и растворяют в дистиллированной воде. Раствор доводят до метки и выдерживают на водяной бане при 60(±1)°С в течение 1 ч. Готовый раствор хранят при комнатной температуре не более 3 мес.

Раствор дезоксихолата натрия: 10 г дезоксихолата натрия помещают в мерную колбу вместимостью 100 см³ и растворяют в дистиллированной воде. Раствор доводят до метки и выдерживают на водяной бане при 60(±1)°С в течение 1 ч. Готовый раствор хранят при комнатной температуре не более 6 мес.

Рецепт 93. Агар дифференциально-диагностический для Proteus. К 1 дм³ расплавленного мясопептонного агара добавляют 15 см³ жидкого дрожжевого экстракта, 10 г маннита, 10 г мальтозы, 80 см³ натуральной бычьей желчи или эквивалентное количество сухой желчи, 2 г железа (III) цитрата, 0,5 г натрия тиосульфата, 0,5 см³ водного раствора кристаллического фиолетового (концентрацией 1 г/дм³), 2 см³ щелочного раствора фенолового красного и 100000 ЕД полимиксина В сульфата или 120000 ЕД полимиксина М сульфата.

Щелочной раствор фенолового красного: 1,6 г фенолового красного растворяют в мерной колбе вместимостью 100 см³ в растворе гидроксида натрия массовой концентрацией 100 г/дм³. Раствор доливают раствором гидроксида натрия до метки. Среду стерилизуют текучим паром при 100 °С в течение 15 мин и разливают по стерильным чашкам Петри. Хранят при 4(±2)°С не более 7 сут. Готовая среда оранжево-красного цвета.

- Читать далее "Питательные среды для Bacillus cereus"

Редактор: Искандер Милевски. Дата публикации: 31.10.2019