Возможность длительного хранения питательных сред без потери присущих им свойств зависит от многих факторов, в частности от типа среды, технологии и условий ее приготовления, качества исходных компонентов, способа стерилизации, вида и качества посуды, способа фасовки, условий хранения.

Для каждой коммерческой питательной среды производители определяют срок годности и условия хранения, при которых не изменяются основные ее физико-химические и биологические показатели, и указывают их на этикетке, а также в инструкции по применению. Среды, не имеющие такой маркировки, перед использованием необходимо контролировать по физико-химическим и биологическим показателям.

а) Стабильность сред. Главные факторы, влияющие на стабильность среды, — это природа ее компонентов, способность их взаимодействовать друг с другом, температура, особенно во время стерилизации, pH среды, кислород, свет. Так, например, цистеин в присутствии кислорода быстро превращается в цистин, растворимость которого значительно ниже, чем у цистеина. Из водорастворимых витаминов больше всего подвержены разрушению тиамин, рибофлавин и пиридоксин.

При доступе кислорода и температуре 37° С растворенный в воде тиамин окисляется в течение недели приблизительно на 50% и теряет биологическую активность. Рибофлавин же светочувствителен и при 32 °С может разрушиться за 1 ч на 50% под действием комнатного рассеянного света. Чувствительностью к свету обладают также фолиевая кислота и пиридоксин. Что касается неорганических солей, то из них соли аммония следует автоклавировать при pH ниже 7,0, иначе некоторая часть аммиака улетучивается.

б) Хранение коммерческих питательных сред. Хранить как сухие, так и готовые к применению коммерческие питательные среды необходимо в соответствии с инструкцией по применению. Все сухие среды гигроскопичны и требуют постоянной защиты от влажного воздуха, так как увлажнение приводит к снижению их качества, порче и т.д. Для некоторых сред принципиальным условием хранения является также отсутствие света, поскольку большинство красителей, индикаторов и факторов роста светочувствительны.

в) Хранение питательных сред лабораторного изготовления. Среды лабораторного изготовления и среды, приготовленные из сухих коммерческих препаратов, необходимо хранить в сухом защищенном от света прохладном помещении. Большинство сред должно храниться при температуре 2-25 °С, питательные среды, содержащие кровь, антибиотики, витамины и другие органические добавки — при температуре не выше 4-6 °С. Максимальный срок хранения приготовленных питательных сред зависит от их типа и лабораторной посуды, в которую они разлиты.

Стерильные лабораторные среды долго хранить не рекомендуется, так как при этом они подвергаются высыханию. Это прежде всего относится к средам, расфасованным в пробирки, колбы и другие сосуды, закупоренные ватно-марлевыми пробками, а также в чашки Петри. При высыхании среды становятся более концентрированными, а следовательно, изменяются их состав и свойства. Кроме того, на поверхности агаризованных сред, расфасованных в пробирки и чашки Петри, возникает недостаток влаги, который обычно устраняют повторным нагреванием среды.

Но это может негативно сказаться на свойствах среды; кроме того, нагревание возможно лишь в том случае, если среда не содержит термолабильных компонентов.

При хранении жидких питательных сред в них не только повышается концентрация компонентов из-за высыхания, но.и снижается pH в результате поглощения средой диоксида углерода из воздуха. Поэтому жидкие среды перед посевом иногда нагревают на водяной бане или текучим паром в течение нескольких минут для удаления растворенных газов (регенерации). Такой процедуре подвергают и среды, предназначенные для культивирования анаэробных микроорганизмов, с целью удаления растворенного в них кислорода воздуха.

г) Примерные сроки хранения сред (если они не относятся к средам для применения ex tempore):
— в пробирках, закупоренных ватно-марлевыми пробками, — 3 нед.;
— в пробирках с плотно прилегающими пробками — 2-3 мес.;
— в бутылках с завинчивающимися крышками — 3 мес.;
— в чашках Петри в заклеенных пластиковых пакетах — 1-3 мес.

- Читать далее "Методы определения сроков годности питательных сред в микробиологии"

Редактор: Искандер Милевски. Дата публикации: 20.05.2019