Суть двухуровневого принципа сводится к следующему. На первом этапе выявляют более общие («грубые») дефекты клеточного и гуморального звена адаптивного (субпопуляции лимфоцитов, изотипы иммуноглобулинов и др.) и врожденного иммунитета (активность фагоцитов и компонентов комплемента). Для этого используют простые, но довольно точные (так называемые ориентирующие) тесты.

В настоящее время минимальный набор таких тестов включает определение:
• относительного и абсолютного числа лейкоцитов и лимфоцитов в периферической крови (общепринятый анализ крови);
• относительного и абсолютного количества Т- и В-лимфоцитов, NK-клеток с использованием моноклональных антител против CD3-, CD19- и CD16-/CD56-MapKepoB соответственно;
• субпопуляций Т-лимфоцитов: Т-хелперов (CD3 CD4+) и ЦТЛ (CD3 CD8+) и их соотношения (CD4/CD8);
• концентрации сывороточных иммуноглобулинов основных классов (IgM, IgG, IgA);
• фагоцитарной активности лейкоцитов, выработки активных форм кислорода;
• активности комплемента;
• возможен анализ других показателей (например, цитокинов).

Если выявлены отклонения показателей в ориентирующих тестах или при специальных показаниях, рекомендуется более тщательно анализировать иммунный статус. На втором этапе использование аналитических тестов позволяет выявить более тонкие и конкретные дефекты в иммунной системе. Комплекс тестов второго уровня может существенно варьировать в зависимости от поставленных врачом задач. Количество и качество их постоянно растут, хотя требования к ним остаются прежними: стандартизация, воспроизводимость, информативность, высокая квалификация персонала лаборатории, и, что очень важно, каждый тест должен отражать тот или иной конкретный показатель или процесс в иммунной системе. Расширение уровня оценки иммунной системы до третьего и так далее нецелесообразно. Достаточно того, что на сегодняшний день генные методы оценки иммунной системы получают всё большее распространение (например, варианты ПЦР и др.).

На втором этапе в зависимости от конкретных задач определяют:
• количество субпопуляций Т-лимфоцитов:Тh1-,Тh2-,Тh17-лимфоциты, естественные (Treg) и индуцированные (Trl, ТhЗ) регуляторные Т-клетки, NKT-лимфоциты, у8Т-клетки и др.;
• фенотипические характеристики клеток иммунной системы на разных этапах иммуногенеза и иммунопоэза (очень важно, например, в онко-иммунологии для определения природы и стадии развития малигнизи-рованных лимфоцитов);
• экспрессию активационных маркеров: CD25, CD69, CD71, HLA-DR и др.; » пролиферативный ответ Т- и В-лимфоцитов на митогены, антигены, аллогенные клетки;
• активационный апоптоз в культуре лимфоцитов in vitro:

• количество и функцию Тh1-, Тh2-лимфоцитов и регуляторных Т-клеток по внутриклеточному содержанию и выработке типичных цитокинов (ИФН-у, ИЛ-4, ТФР-р соответственно);
• активность киллерных лимфоцитов (ЦТЛ, NK-клеток и др.) с определением гранзимов/перфорина и осуществлением апоптоза через Fas/FasL;
• классы и подклассы сывороточных, секреторных и других иммуноглобулинов (IgM, IgGl, IgG2, IgG3, IgG4, IgAl, IgA2, IgE); антитела разной специфичности, в том числе аутоантитела, иммунные комплексы, патологические иммуноглобулины;
• синтез иммуноглобулинов в культуре В-лимфоцитов in vitro

• наиболее типичные цитокины в сыворотке крови и различных биологических жидкостях;
• различные этапы фагоцитоза и рецепторного аппарата фагоцитов;
• подавление миграции моноцитов in vitro в присутствии митогена или специфичного для Т-лимфоцитов антигена;
• функцию рецепторов врожденного иммунитета (TLR и др.); • содержание различных компонентов комплемента;
• результаты (при отсутствии противопоказаний) кожных тестов ГЗТ на туберкулин, антигены грибов, аллергены;
• другие показатели.

- Читать далее "Материалы для исследования иммунитета. Понятие нормальный иммунный статус"