Дифференциально диагностические среды для некоторых грамотрицательных бактерий

Рецепт 8. Среда Эндо (селективная среда для энтеробактерий). 100 мл стерильного МПА (pH 7,4) расплавляют на водяной бане и охлаждают до 70 °С, прибавляют 1 г лактозы (х.ч.), предварительно растворенной в стерильной пробирке в небольшом количестве дистиллированной воды и прокипяченной. В отдельных пробирках готовят 2-3 мл спиртового насыщенного раствора фуксина и 10 мл 10% водного раствора Na2SO3.

В стерильную пробирку вносят 1 мл фуксина и прибавляют раствор сульфита натрия до обесцвечивания фуксина (бледно-розовый цвет). Приготовленную смесь вливают в расплавленный МПА с лактозой, хорошо перемешивают и разливают по стерильным чашкам. Правильно приготовленная среда в горячем виде имеет бледно-розовый цвет, а при застывании становится бесцветной. Среду используют сразу, без стерилизации.

Среда выпускается в сухом виде. Ее готовят по прописи на этикетке.

Рецепт 9. Среда Эндо с розоловой кислотой (в модификации Т. З. Артемовой). Среду готовят из сухого препарата по прописи на этикетке. В готовую и охлажденную до 60-70 °С среду перед разливкой в чашки прибавляют (на 100 мл среды) 0,2 см3 10% спиртового раствора основного фуксина (для повышения дифференцирующих свойств среды) и 0,2 см3 5% спиртового раствора розоловой кислоты (во избежание зарастания посевов споровыми аэробными бактериями).

После тщательного перемешивания среду разливают в стерильные чашки Петри по 20-25 см3. Если на поверхности среды заметны следы влаги, чашки перед посевом необходимо подсушить. Для этого можно оставить чашки со средой на 0,5-1 ч для застывания и подсушивания накрытыми стерильными кружками фильтровальной бумаги. Хранить чашки со средой можно не более 2-3 сут. в темноте или в холодильнике. Срок хранения растворов фуксина и розоловой кислоты не более 1 месяца.

Рецепт 10. Среда Плоскирева. Среду Плоскирева готовят из сухого препарата по прописи на этикетке.

Рецепт 11. Среда Левина. К 100 см3 расплавленного стерильного мясо-пептонного агара (pH 7,0-7,4) добавляют 2 см3 0,5% водного раствора, предварительно подогретого на водяной бане метиленового синего, 1,5 см3 2% раствора эозина, 2 г лактозы и 0,2 г двузамещенного фосфорно-кислого калия. Растворы красок готовят на дистиллированной воде и стерилизуют 1 ч при температуре 100 °С. После добавления всех компонентов в указанном порядке среду тщательно перемешивают, разливают в стерильные чашки Петри и подсушивают. Среда должна быть красно-фиолетового цвета.

Среду Левина также можно приготовить из сухого препарата, руководствуясь прописью на этикетке.

Рецепт 12. Агар с бриллиантовым зеленым и феноловым красным (БФА). Основа среды: в 1 дм3 дистиллированной воды вносят 50 г сухого питательного агара, 10 г лактозы, 40 см3 0,1 моль/дм3 соляной кислоты. Смесь выдерживают при комнатной температуре в течение 30 мин, затем в кипящей водяной бане не менее 1 ч, после чего на открытом огне (электроплитке) в течение 3-5 мин. Среду фильтруют через вату (небольшая мутность допустима). Основу разливают во флаконы или колбы и стерилизуют при 121(±1)°С в течение 30 мин. Основу среды хранят в холодильнике не более 1 мес. со дня приготовления.

В 100 см3 стерильной расплавленной и охлажденной до 45 °С основы вносят 4,1 см3 смеси красок. Среду разливают по стерильным чашкам Петри. Готовая среда имеет цвет бутылочного стекла—зеленовато-желтый.

Смесь красок: в 200 см3 раствора фенолового красного добавляют 5 см3 раствора бриллиантового зеленого. Смесь хранят в холодильнике. Срок хранения смеси не ограничен.

Раствор бриллиантового зеленого: 0,5 г бриллиантового зеленого растворяют в 100 см3 дистиллированной воды. Раствор фенолового красного: 0,4 г фенолового красного, 16 см3 0,1 моль/дм3 гидроокиси натрия смешивают с 184 см3 дистиллированной воды. Оба приготовленных раствора в плотно закрытых флаконах выдерживают в термостате при температуре 37 °С в течение суток. Небольшим нерастворившимся осадком можно пренебречь.

- Читать далее "Питательные среды для учета различных групп почвенных микроорганизмов"

Редактор: Искандер Милевски. Дата публикации: 24.10.2019

Остались вопросы или замечания?

Все размещенные статьи преследуют образовательную цель и предназначены для лиц имеющих базовые знания в области медицины.
Без консультации лечащего врача нельзя применять на практике любой изложенный в статье факт.
Жалобы и возникшие вопросы просим присылать на адрес statii@dommedika.com
На этот же адрес ждем запросы на координаты авторов статей - быстро их предоставим.