Питательные среды для учета различных групп почвенных микроорганизмов

Рецепт 13. Почвенный агар для исследования почвы. Воздушно-сухую почву, отобранную из верхнего горизонта исследуемой почвы или любой почвы, богатой органическими веществами (торфяная, чернозем), освобождают от растительных остатков и других включений, измельчают в ступке и просеивают через сито с отверстиями диаметром 1 мм. Измельченную таким образом почву помещают в колбу и заливают дистиллированной водой в соотношении 1:9. В полученную суспензию добавляют 2% агара и стерилизуют дважды при 120(±2) °С в течение 1 ч. Среду охлаждают до 50-60 °С и добавляют к ней стерильный дрожжевой автолизат (1 мл на 100 мл среды). Готовую среду тщательно перемешивают и разливают по стерильным чашкам Петри (в чашку должна попасть среда вместе с почвенными частицами). Посев осуществляют поверхностным способом.

Рецепт 14. Среда булъон-сусло-агар (БСА) для обнаружения спорообразующих микроорганизмов в почве. Мясопептонный бульон смешивают с равным объемом 6 °Б сусла (готовое сусло получают на пивоваренном заводе) и добавляют 2 г/л агара. Среду стерилизуют при 112(±1)°С 20-30 мин.

Рецепт 15. Крахмалоаммиачная среда (КАА) для учета актиномицетов. Среда состава (г): растворимый крахмал—10,0; (NH4)2SO4 — 2,0; К2НРO4 —1,0; MgSO4•7H2O — 1,0; NaCl—1,0; CaCO3 — 3,0; агар — 15,0; вода водопроводная— 1000 мл. Крахмал предварительно заваривают отдельно в небольшом количестве горячей воды и затем приливают к остальной среде. Среду стерилизуют при 121(±1)°С 20-30 мин.

Рецепт 16. Среда Ваксмана для учета актиномицетов. Средасостава(г):глицерин—3,0; К2НРO4 — 1,0; NaNO3 — 2,0; MgSO4•7Н2O—0,5; КCl — 0,5; FeSO4•7H2O — 0,01; вода водопроводная 1000 мл; pH 7,0. Среду стерилизуют при 112(±1)°С 20-30 мин.

Рецепт 17. Сусло-агар (СА) для учета грибов. Используют 3-4 °Б сусло (готовое сусло получают на пивоваренном заводе). В среду вносят агар — 20 г/л, а затем стерилизуют при 112(±1)°С 20-30 мин. Перед посевом в расплавленный сусло-агар стерильно добавляют 0,4% (по объему) концентрированной молочной кислоты.

Рецепт 18. Среда Чапека для учета грибов. Среда состава (г): сахароза—30,0 или глюкоза—20,0; NaNO3—2,0; К2НРO4 — 1,0; MgSO4•7H2O—0,5; КС1—0,5; FeSO4•7H2O—0,1; вода дистиллированная—1000 мл. Среду стерилизуют при 112(±1)°С 20-30 мин. Иногда перед посевом в расплавленную среду стерильно добавляют 0,4% (по объему) концентрированной молочной кислоты.

Рецепт 19. Среда Виноградского для нитрифицирующих бактерий. Среда состава (г): (NH4)2SO4—2,0; К2НРO4—1,0; MgSO4•7H2O—0,5; NaCl—2,0; FeSO4•7H2O — 0,05; СаСO3 — 5,0; вода водопроводная 1000 мл. Среду стерилизуют при 121(±1)°С 20-30 мин.

Рецепт 20. Силикагель (кремнекислый гель). Используют в качестве твердой основы для синтетических сред строго определенного состава. К соляной кислоте уд. веса 1,1 добавляют при перемешивании равный объем жидкого стекла (раствор Na2SiO3 или K2SiO3) того же удельного веса. Смесь разливают в чашки Петри по 25-30 мл в каждую. Чашки оставляют на горизонтальной поверхности на несколько часов для образования геля. Как только гель станет плотным, открытые чашки помещают в стеклянный или эмалированный сосуд и промывают проточной водой для удаления хлоридов. Наличие хлоридов проверяют качественной реакцией с 1-1,5% раствором AgNO3. Поскольку водопроводная вода содержит значительное количество ионов хлора, гель перед проведением реакции с нитратом серебра несколько раз промывают горячей дистиллированной водой. Последний смыв наливают в чистую пробирку, туда же добавляют 2-3 капли раствора AgNO3. В присутствии хлоридов образуется белый осадок или помутнение. Если помутнения нет, то гель готов к употреблению. Если необходимо, чашки с гелем заворачивают в пергаментную бумагу и, не переворачивая, стерилизуют в автоклаве при 112(±1)°С 15 мин. Чашки с силикагелем до употребления хранят в сосудах под водопроводной водой.

Рецепт 21. Среда Гетчинсона и Клейтона для аэробных бактерий, использующих целлюлюзу. Целлюлюза—кусочки фильтровальной бумаги (10 г/л); NaNO3 — 2,5 г; К2НРO4 — 1,0 г; MgSO4•7H2O—0,3 г; NaCl — 0,1 г; СаСl2•4Н2O — 0,1 г; FeCl3•6H2O — 0,01 г; вода дистиллированная—1000 мл; pH — 7,2-7,3. Среду стерилизуют при 121(±1)°С 20-30 мин.

Рецепт 22. Среда для мезофильных анаэробных бактерий, использующих целлюлюзу. (NH4)3PO4 —1,0 г; К2НРO4 —1,0 г; MgSO4•7H2O — 0,5 г; NaCl — следы; вода водопроводная — 1000 мл.

Рецепт 23. Среда для термофильных анаэробных бактерий, использующих целлюлюзу. Пептон — 5,0; (NH4)2HPO4 — 1,5 г; К2НРO4 и КН2РO4 — по 0,5 г; MgSO4•7H2O— 0,4 г; NaCl — 0,1 г; MnSO4 и FeSO4 — следы; вода водопроводная — 1000 мл.

- Читать далее "Питательные среды для Pseudomonas aeruginosa"

Редактор: Искандер Милевски. Дата публикации: 24.10.2019

Остались вопросы или замечания?

Все размещенные статьи преследуют образовательную цель и предназначены для лиц имеющих базовые знания в области медицины.
Без консультации лечащего врача нельзя применять на практике любой изложенный в статье факт.
Жалобы и возникшие вопросы просим присылать на адрес statii@dommedika.com
На этот же адрес ждем запросы на координаты авторов статей - быстро их предоставим.