Питательные среды для стафилококков

Рецепт 60. Солевой или сахарный бульон для выделения стафилококков. 6 г хлористого натрия или 1 г глюкозы растворяют в 100 см3 мясопептонного бульона, устанавливают pH таким образом, чтобы после стерилизации он составлял при 25 °С 6,9(±0,1). Бульон разливают в колбы или пробирки и стерилизуют при 121(±1) °С в течение 15 мин.

Рецепт 61. Лично-желточная взвесь (желточная эмульсия). Яично-желточная взвесь: свежее куриное яйцо моют водопроводной водой, затем протирают ватой, смоченной в 70% спирте, и обсушивают. Отделяют желток и вносят его в 100 см3 стерильного изотонического раствора хлористого натрия (физиологического раствора). Тщательно перемешивают при помощи стерильных стеклянных бус.

Желточную эмульсию готовят аналогичным образом, но берут два желтка и смешивают с 10 см3 физиологического раствора. Приготовленная эмульсия может храниться при температуре 0-5 °С не более 72 ч.

Рецепт 62. Молочно-желточно-солевой агар (МЖСА) с полимиксином для обнаружения стафилококков при исследовании воды. Сухой питательный агар—40-50 г; NaCl—90 г; вода дистиллированная—до 1000 мл. Среду расплавляют при нагревании, устанавливают pH 7,2-7,4, затем разливают в мерные сосуды и стерилизуют при 121(±1) °С в течение 20 мин. Перед употреблением в расплавленный и охлажденный до 50-55 °С солевой агар добавляют (из расчета на 100 мл среды) 10 мл стерильного обезжиренного молока, 10 мл желточной смеси (один яичный желток, тщательно смешанный в асептических условиях с 50 мл изотонического раствора при помощи стеклянных бус), полимиксин М (раствор хранить не более 14 дней) 30000 ЕД. Все компоненты тщательно смешивают.

Готовую среду разливают в стерильные чашки Петри толстым слоем (по 20-25 мл) для выращивания бактерий на мембранных фильтрах и тонким слоем (по 15 мл)—для подтверждающего этапа.

Рецепт 63. Яично-желточно-солевой агар. 1 дм3 мясопептонного агара перед анализом расплавляют и растворяют в нем 95 г хлористого натрия, охлаждают до температуры 45(±1) °С и добавляют 100 см3 яично-желточной взвеси. Смесь тщательно перемешивают и разливают в стерильные чашки Петри. Чашки хранят в холодильнике не более 5 суток.

Рецепт 64. Яично-желточно-азидный агар. 10 г пептона, 3 г хлористого натрия, 0,2 г двузамещенного фосфорно-кислого натрия, 15 г агар-агара, 5,5 г мясного экстракта растворяют при нагревании в 1 дм3 дистиллированной воды. При отсутствии мясного экстракта используют мясную воду. В этом случае все компоненты растворяют в 1 дм3 мясной воды. Устанавливают pH среды 7,6(±0,1), стерилизуют в автоклаве при 121(±1)°С в течение 30 мин, охлаждают до температуры 50-60 °С, добавляют 0,15 г азида натрия, смешивают, вновь стерилизуют при температуре 121(±1)°С в течение 30 мин, охлаждают до температуры 50 °С, добавляют 150 см3 яично-желточной взвеси, смешивают и разливают по 15 см3 в чашки Петри.

Рецепт 65. Молочно-солевой агар. Непосредственно перед посевом к 1 дм3 расплавленного и охлажденного до температуры 60-70 °С мясопептонного агара, содержащего 65 г хлористого натрия, добавляют 100 см3 стерильного обезжиренного молока. Устанавливают pH 7,4(±0,1), тщательно перемешивают и разливают в стерильные чашки Петри.

Рецепт 66. Байрд-Паркер агар. Основа среды: в 1 дм3 дистиллированной воды вносят 10 г триптона или пептона, 17,9 г хлористого лития 6-водного, 5 г мясного экстракта и 5 см3 (или 1 г) дрожжевого экстракта, 20 г агар-агара.

При отсутствии мясного экстракта вместо дистиллированной воды и мясного экстракта используют 1 дм3 мясной воды или бульона Хоттингера либо 1 дм3 мясопептонного бульона. При использовании мясопептонного бульона триптон или пептон в среду не вносят.

Все компоненты, внесенные в 1 дм3 дистиллированной воды (мясопептонного бульона или бульона Хоттингера), нагревают, помешивая до полного растворения, охлаждают до 50-60 °С. Устанавливают pH 6,8-7,0, разливают в колбы по 90 см3 и стерилизуют в автоклаве при 121(±1) °С в течение 20 мин. К 90 см3 расплавленной и охлажденной основы среды добавляют асептически 5 см3 желточной эмульсии и стерилизованные фильтрованием через мембранный фильтр растворы: 6,3 см3 раствора глицина концентрации 200 г/дм3, 5 см3 раствора пирувата натрия концентрации 200 г/дм3 и 1 см3 раствора теллурита калия концентрации 10 г/дм3.

После тщательного перемешивания готовую среду разливают в стерильные чашки Петри. Чашки со средой можно хранить не более 48 ч.

Рецепт 67. Среда с ДНК (для выявления термостабильной нуклеазы). Растворяют в 1 дм3 дистиллированной воды 6,1 г трисаминометана и доводят pH раствора до 9,0(±0,1).

К раствору добавляют 0,3 г ДНК, 10 г хлористого натрия, 1,1 см3 раствора хлористого кальция концентрации 1 г/дм3, 15 г агар-агара и нагревают смесь до полного расплавления агара. К охлажденной до 65-55 °С среде добавляют 9,2 см3 водного раствора толуидина синего «С» концентрации 10 г/дм3, тщательно перемешивают и разливают по стерильным чашкам Петри. Допускается хранение среды при температуре 6(±2)°С не более 7 суток.

- Вернуться в оглавление раздела "Медицинская микробиология"

Редактор: Искандер Милевски. Дата публикации: 24.10.2019

Остались вопросы или замечания?

Все размещенные статьи преследуют образовательную цель и предназначены для лиц имеющих базовые знания в области медицины.
Без консультации лечащего врача нельзя применять на практике любой изложенный в статье факт.
Жалобы и возникшие вопросы просим присылать на адрес statii@dommedika.com
На этот же адрес ждем запросы на координаты авторов статей - быстро их предоставим.