Питательные среды для дрожжей и плесневых грибов

Рецепт 37. Среда Сабуро для учета дрожжей и плесневых грибов. Основа среды: 40 г глюкозы, 10 г пептона и 18 г агар-агара добавляют к 1 дм3 дистиллированной воды. Смесь подогревают, периодически помешивая, до растворения компонентов, охлаждают до 45-55 °С и устанавливают pH таким образом, чтобы после стерилизации он составлял при 25 °С 6,5(±0,1). Готовую питательную среду разливают в стерильные колбы и стерилизуют в автоклаве при 121(±1)°С в течение 15 мин. Основу среды хранят при температуре 4(±2)°С не более 14 сут.

Перед использованием к 1 дм3 стерильной основы добавляют 2 см3 раствора левомицетина сукцината растворимого (для инъекций) массовой концентрацией 50 г/дм3 или 1 см3 раствора массовой концентрацией 100 г/дм3. При использовании раствора левомицетина массовой концентрации 5 г/дм3 к 980 см3 основы добавляют 20 см3 раствора. Допускается раствор левомицетина стерилизовать вместе с основой среды. Вместо левомицетина можно использовать другие антибиотики — окситетрациклин (100 см3 раствора окситетрациклина дигидрата массовой концентрацией 1 г/дм3 на 900 см3 основы), окситетрациклин и гентамицин (100 см3 раствора окситетрациклина дигидрата массовой концентрацией 1 г/дм3 и 5 см3 раствора гентамицина массовой концентрацией 10 г/дм3 на 895 см3 основы), антибиотики группы пенициллина и стрептомицина (1 или 0,5 см3 раствора антибиотика группы пенициллина, содержащего соответственно 50000 или 100000 ЕД и 0,4 см3 антибиотика группы стрептомицина массовой концентрацией 100 г/дм3 на 1 дм3 основы), неомицин (7 см3 раствора неомицина сульфата массовой концентрацией 50 г/дм3 на 1 дм3 основы). Растворы антибиотиков стерилизуют методом мембранной фильтрации.

Агаризованную среду Сабуро, выпускаемую в сухом виде, готовят по прописи на этикетке.

Рецепт 38. Жидкая среда Сабуро для учета дрожжей и плесневых грибов. Жидкую среду Сабуро готовят так же, как и агаризованную, но без добавления агар-агара.

Рецепт 39. Солодовое (неохмеленное пивное) сусло для культивирования дрожжей и плесневых грибов. К 1 дм3 водопроводной воды, подогретой до 50(±1) °С, прибавляют 200 г молотого ячменного солода. Смесь тщательно перемешивают в течение 30 мин, подогревают на водяной бане, поднимая температуру со скоростью 1 °С в 1 мин до 55(±1)°С, выдерживают паузу 15 мин, затем вновь с той же скоростью поднимают температуру до 63-65 °С и удерживают ее на этом уровне в течение 1 ч. Температуру поднимают со скоростью 1 °С в 1 мин до 72(±1)°С и выдерживают сусло при этой температуре до полного осахаривания. Для определения степени осахаривания каплю сусла переносят в фарфоровую чашку и осторожно прибавляют каплю раствора Люголя (полностью осахаренное сусло не должно менять окраску в присутствии индикатора). Полученное сусло фильтруют через полотно или фильтровальную бумагу, доводят объем до 1 дм3 и стерилизуют в автоклаве при 107-110 °С в течение 30 мин. Затем сусло декантируют.

Прозрачное сусло разбавляют водой до массовой доли сухих веществ 7-8%. Определяют концентрацию сахаров, пользуясь ареометром Баллинга, градусы (°Б) которого примерно соответствуют процентному содержанию сахара в растворе. Полученное сусло стерилизуют в автоклаве при 116(±1)°С в течение 20 мин.

Можно также использовать готовое неохмелеиное пивное сусло, которое получают на пивных заводах.

Рецепт 40. Солодовое агаризованное сусло для культивирования дрожжей и плесневых грибов. К 1 дм3 солодового неохмеленного сусла с массовой долей сухих веществ 7-8%. добавляют 20 г агар-агара. Среду расплавляют на водяной бане и фильтруют через гигроскопическую вату или фильтровальную бумагу. Фильтрат разливают по стерильным колбам или пробиркам и стерилизуют в автоклаве при 116(± 1) °С в течение 15 мин или 3 сут. по 30 мин текучим паром при температуре 100(±1) °С.

Для выявления дрожжей и плесневых грибов в субстратах, обильно обсемененных микроорганизмами, сусло перед использованием подкисляют 2-3 см3 стерильного раствора лимонной кислоты с массовой концентрацией 200 г/дм3 или стерильным 40% раствором молочной кислоты до pH 3,5; в этом случае при приготовлении среды увеличивают количество агар-агара до 30 г на 1 дм3.

Рецепт 41. Агаризованное солодовое сусло с сахарозой для учета осмотолерантных дрожжей и плесневых грибов в сгущенных молочных консервах с сахаром. К 500 см3 солодового сусла добавляют 420,0 г сахара-рафинада и нагревают, перемешивая до полного его растворения, фильтруют, охлаждают до 50(±5) °С. Доводят молочной кислотой pH до 3,6(±0,1) при температуре 25(±1 °С), разливают по 60 см3 в колбы и стерилизуют текучим паром в течение 30 мин.

Приготовление агаризованного сусла: к 500 см3 солодового сусла с pH 3,6±0,1 добавляют 30,0 г агар-агара, нагревают и при перемешивании расплавляют агар-агар. Среду фильтруют, разливают по 40 см3 в колбы и стерилизуют текучим паром в течение 30 мин.

Непосредственно перед посевом агаризованное сусло расплавляют на водяной бане, а сусло с сахарозой нагревают до 50(±5) °С и две эти части смешивают.

Рецепт 42. Агаризованная среда с сахаром-рафинадом для учета осмотолерантных дрожжей и плесневых грибов в пищевых продуктах. Сначала готовят сусло с сахарозой: к 500 см3 солодового сусла добавляют 420 г сахара-рафинада, нагревая, помешивают до полного его растворения. Смесь фильтруют и охлаждают до 50(±5)°С. При помощи молочной кислоты устанавливают pH таким образом, чтобы после стерилизации он составлял при 25 °С 3,6(±0,1). Среду разливают в стерильные колбы по 60 см3 и стерилизуют текучим паром в течение 30 мин. Среду фильтруют и разливают по 40 см3 в колбы, а затем стерилизуют текучим паром в течение 30 мин.

Для приготовления агаризованного сусла 15 г агар-агара добавляют к 345 см3 дистиллированной воды и оставляют на 30 мин для набухания. Затем расплавляют при нагревании на водяной бане и добавляют 20 г глюкозы, 25 см3 дрожжевого экстракта. В полученной смеси при нагревании на водяной бане постепенно растворяют 610 г сахара-рафинада. После расплавления сахара смесь охлаждают до 50(±5)°С и устанавливают pH таким образом, чтобы после стерилизации он составлял при 25 °С 5,8(±0,1). Агаризованное сусло разливают в стерильные колбы и стерилизуют текучим паром в течение 30 мин.

Непосредственно перед посевом агаризованное сусло расплавляют на водяной бане, а сусло с сахарозой нагревают до температуры 50(+5) °С и две эти части смешивают.

Рецепт 43. Жидкая среда с сахаром-рафинадом для учета осмотолерантных дрожжей и плесневых грибов в пищевых продуктах. 610 г сахара-рафинада, 20 г глюкозы и 25 см3 дрожжевого экстракта добавляют постепенно мри нагревании на водяной бане к 345 см3 дистиллированной воды. После расплавления сахаров смесь охлаждают до 50(±5)°С и устанавливают pH таким образом, чтобы после стерилизации он составлял при 25 °С 5,8(±0,1). Готовую питательную среду разливают в стерильные колбы или пробирки и стерилизуют текучим паром в течение 30 мин.

- Читать далее "Питательные среды для бактерий группы кишечных палочек"

Редактор: Искандер Милевски. Дата публикации: 24.10.2019

Остались вопросы или замечания?

Все размещенные статьи преследуют образовательную цель и предназначены для лиц имеющих базовые знания в области медицины.
Без консультации лечащего врача нельзя применять на практике любой изложенный в статье факт.
Жалобы и возникшие вопросы просим присылать на адрес statii@dommedika.com
На этот же адрес ждем запросы на координаты авторов статей - быстро их предоставим.