Среду готовят двух видов: нормальную и концентрированную.

Среда нормальной концентрации: пептон—10 г; NaCl — 5 г; лактоза—5 г; вода дистиллированная — 1 дм³. После растворения указанных компонентов добавляют индиктор (2 см³ 1,6% спиртового раствора бромтимолового синего или 10 см³ индикатора Андреде), устанавливают pH 7,4-7,6. Готовую среду разливают по 10 см³ в пробирки с поплавками или с комочками ваты, стерилизуют в автоклаве при 112°С в течение 12 мин.

Для приготовления концентрированной среды количество всех компонентов, кроме воды, увеличивают в 10 раз.

Рецепт 45. Лактозная среда с борной кислотой для исследования воды. 10 г пептона, 12,2 г калия фосфорнокислого двузамещенного (безводного), 4,1 г калия фосфорно-кислого однозамещенного (безводного), 3,2 г борной кислоты, 5 г лактозы растворяют в 1 дм³ дистиллированной воды, разливают по 5 см³ в пробирки с поплавками и стерилизуют в автоклаве при 112 °С в течение 12 мин. Срок хранения среды — не более 2 недель.

Рецепт 46. Полужидкая среда с глюкозой. Полужидкую среду с индикатором ВР и глюкозой выпускают в сухом виде. Среду готовят по прописи на этикетке. Срок хранения готовой среды — не более 7 сут.

При отсутствии сухих сред в 1 дм³ дистиллированной воды растворяют 10г пептона, 5 г NaCl, 4-5 г агар-агара, доводят до кипения, устанавливают pH 7,2-7,4 и добавляют 1 см³ 1,6% спиртового раствора бромтимолового синего. Среду стерилизуют в автоклаве при 120(±2) °С в течение 20 мин. В расплавленную стерильную среду вносят 5 г глюкозы, нагревают до кипения, разливают в стерильные пробирки столбиком высотой около 3 см и стерилизуют при 112 °С в течение 12 мин. Срок хранения среды—не более 7 сут.

Рецепт 47. Среда Кесслера. 10 г пептона, 2,5 г лактозы, 5 г сухой говяжьей желчи или 50 см³ натуральной желчи, 2 см³ водного раствора генцианвиолета, или кристаллического фиолетового, или метилового фиолетового концентрации 10 г/дм³ добавляют к 1 дм³ дистиллированной воды (если используют натуральную желчь—к 950 см³ воды), тщательно перемешивают, нагревают на слабом огне до кипения и кипятят 1-2 мин, фильтруют через ватно-марлевый фильтр, охлаждают до 45-55 °С, устанавливают pH таким образом, чтобы после стерилизации он составлял при 25 °С 7,3(±0,2), разливают по 10 см3 в пробирки с поплавками или в колбы по 100 см³ и стерилизуют в автоклаве при 115(±1)°С в течение 20 мин.

Рецепт 48. Лактозный бульон с бриллиантовым зеленым и желчью. 10г пептона, 5 г лактозы, 6,45 двузамещенного фосфорно-кислого безводного натрия, 2 г однозамещенного фосфорно-кислого безводного калия, 20 г сухой говяжьей желчи или 200 см³ натуральной желчи, 3 см³ водного раствора бриллиантового зеленого концентрации 5 г/дм³ добавляют к 1 дм³ дистиллированной воды (если используют натуральную желчь — к 800 см³ воды), тщательно перемешивают, нагревают на слабом огне до кипения и кипятят 1-2 мин, фильтруют через ватно-марлевый фильтр, охлаждают до 45-55 °С, устанавливают pH таким образом, чтобы после стерилизации он составлял при 25 °С 7,2(±0,1), после чего среду вновь доводят до кипения.

Среда не подлежит стерилизации в автоклаве, ее разливают с соблюдением правил асептики по 10 см³ в стерильные пробирки с поплавками или по 100 см³ в колбы.

Рецепт 49. Бульон Мак-Конки. 20 г пептона, 10 г лактозы, 5 г хлористого натрия, 5 г сухой говяжьей желчи или 50 см³ натуральной желчи, 1 см³ раствора бромкрезолового пурпурного добавляют к 1 дм³ дистиллированной воды (если используют натуральную желчь—к 950 см³ воды), тщательно перемешивают, нагревают на слабом огне до кипения и кипятят 1-2 мин, фильтруют через ватно-марлевый фильтр, охлаждают до 45-55 °С, устанавливают pH таким образом, чтобы после стерилизации он составлял при 25 °С 7,2(±0,1), разливают по 10 см³ в пробирки с поплавками или в колбы по 100 см³ и стерилизуют в автоклаве при 121(±1) °С в течение 15 минут.

Щелочной раствор бромкрезолового пурпурного: 1 г бромкрезолового пурпурного переносят в фарфоровую ступку с 19 см³ раствора гидроокиси натрия концентрации 0,1 моль/дм³ и после растворения добавляют 80 см³ дистиллированной воды.

Рецепт 50. Среда Кода. Среда Кода выпускается Дагестанским НПО «Питательные среды», готовится по прописи, указанной на этикетке.

Рецепт 51. Среда Хейфеца. В 1 дм³ водопроводной воды растворяют 10 г пептона, 5 г хлористого натрия и 5 г маннита, устанавливают pH 7,4-7,6, нагревают до кипения, фильтруют, добавляют 1 см³ спиртового раствора 50 г/дм³ розоловой кислоты и 2,5 см³ раствора 1 г/дм³ метиленового голубого, стерилизуют однократно, нагревая 20 мин в аппарате Коха, или кипятят в колбе, закрытой ватной пробкой в течение 5 мин. Среду разливают по 7-9 см³ в пробирки. Цвет среды в пробирках должен быть краснофиолетовый.

Раствор розоловой кислоты: 0,5 г розоловой кислоты заливают 10 см³ этилового ректифицированного спирта, через 24 ч раствор готов к употреблению. Раствором можно пользоваться в течение 1 мес. с момента его приготовления.

Раствор метиленового голубого: 0,1 г метиленового голубого заливают 100 см³ дистиллированной воды, через 24 ч раствор готов к употреблению. Срок хранения раствора не ограничен.

Рецепт 52. Среда ХБ (хинозол-бромкрезол-пурпурная). В 1 дм³ водопроводной воды растворяют 10 г пептона, 5 г хлористого натрия и 5 г маннита, кипятят 15-20 мин, устанавливают pH 7,4-7,6, фильтруют через бумажный фильтр, вновь кипятят 10 мин и охлаждают до температуры 60 °С. Стерильно добавляют 30 см³ дрожжевого автолизата, 15 см³ желчи крупного рогатого скота, 10 см³ водного раствора хинозола (1:1000) и 10 см³ 1,6% спиртового раствора бромкрезолового пурпурного. Среду разливают в стерильные пробирки по 7-8 см³. Цвет готовой среды — фиолетовый.

- Читать далее "Питательные среды для сальмонелл"

Редактор: Искандер Милевски. Дата публикации: 24.10.2019