Большинство возбудителей анаэробной и смешанной инфекции человека представлены строгими анаэробными и микроаэрофильными видами, которые очень чувствительны к атмосферному кислороду и требовательны к составу питательных сред. В связи с этим, следует опасаться, что при традиционных вариантах транспортировки и исследования (без применения анаэробной техники культивирования) в клинических лабораториях будут выделяться преимущественно представители рода Staphylococcus, некоторые виды энтеробактерий и бацилл, но не анаэробов.

Нарушение основных правил проведения начальных этапов бактериологического исследования является наиболее широко распространенной ошибкой при этиологической диагностике оппортунистических инфекций, в частности, одонтогенной инфекции, хронических воспалительных заболеваний органов дыхания, мочевыделительной системы и др. Следствием этого является гипердиагностика — например, стафилококковой инфекции.

Для устранения серьезных ошибок при проведении начальных этапов бактериологического исследования на неклостридиальные анаэробы необходимо соблюдать следующие правила.

• Обеспечение минимального контакта с атмосферным воздухом. При взятии материала тампоном или при помощи пункции он немедленно помещается в транспортную среду во флаконе с бескислородной газовой смесью или в пробирку с полужидкой редуцирующей транспортной средой; при пункции материал может быстро транспортироваться непосредственно в шприце, на иглу которого накалывают резиновую пробку. Обеспечение максимального снижения метаболической активности микроорганизмов (использование транспортных сред с «консервирующими» свойствами, в которых микроорганизмы сохраняют жизнеспособность, но практически не размножаются — тиогликолевая среда, среда Стюарта, среда Эймиса и др.).

• Обеспечение постоянства температуры при транспортировке. Главное — избежать перепадов температуры, поэтому, возможны два температурных режима: при 36—37°С и при 4-6°С, причем последний ограничивает метаболическую активность и позволяет сохранить исходное соотношение разных микробов в материале.

• Обеспечение сокращения времени от момента взятия материала до первичного посева.

Вышеперечисленные моменты позволяют сохранить максимальное количество жизнеспособных клеток анаэробных и микроаэрофильных бактерий и добиться того количественного соотношения бактерий разных видов, которое имело место в исследуемом материале.

Первичный посев для получения изолированных колоний должен быть количественным (способ разведений в жидкой питательной среде) или полуколичественным (секторальный способ на плотной среде по Гольду).

Ряд авторов в качестве наиболее объективного показателя для количественного исследования предлагают определять количество микробов в 1,0 г или 1,0 мл материала. Однако с нашей точки зрения данный метод имеет ряд недостатков:

• глубина проникновения различных микробов в ткани не одинакова и подавляющая их часть расположена в «просвете» гнойной раны;

• взятие материала или биопсия из очага при глубокой локализации фокуса воспаления не всегда возможны, так как сложно рассчитать его локализацию;

• сохраняется высокая вероятность контаминации материала не только при его выделении из раны, но и при последующей обработке (взвешивание, измельчение и т.д.).

В связи с этим оптимальной следует считать транспортировку материала, взятого шприцем или сорбирующим тампоном, в транспортной среде Стюарта, Эймиса или наборах «Transpocult» (Orion, Финляндия). Перечисленные среды обеспечивают сохранность большинства клинически важных изолятов анаэробных бактерий в течение 2-х педель. Для представителей высоко требовательных видов желательна доставка материала в течение первых же суток.

Бактериологическому исследованию подвергают различные виды материалов с учетом локализации воспаления. Это могут быть биологические жидкости (кровь, лимфа, ликвор, моча, желчь), в том числе жидкие секреты и отделяемое из внутренних органов, серозный и гнойный экссудат воспалительных очагов, промывные (лаваж) воды, испражнения, рвотные массы, биопсийный материал и т.п. При диагностике заболеваний пародонта и одонтогенной инфекции для исследования берут ротовую жидкость (смешанную слюну), десневую жидкость, зубную бляшку (биопленку), экссудат из пародонтальных карманов, абсцессов и т.п.

Важнейшей особенностью диагностики анаэробной инфекции является проведение количественного исследования обсемененности материала.

- Читать далее "Методика количественного исследования анаэробной (неклостридиальной) инфекции"

Редактор: Искандер Милевски. Дата публикации: 24.4.2020