Тест на образование ацетилметилкарбинола (реакция Фогес-Проскауэра [VP] в модификации Баррита)

В бактериологической практике реакция VP используется как один из наиболее достоверных тестов при идентификации представителей родов Klebsiella, Serratia и Hafnia. При посеве указанных микроорганизмов на среду Кларка анаэробное сбраживание глюкозы идет не по пути накопления смеси кислот, как в реакции с метиленовым красным, а с преобразованием метаболита пировино-градной (α-оксипропионовой) кислоты в ацетоин или ацетилметилкарбинол (СН3СО-СН(ОН)-СН3) —один из конечных продуктов сбраживания глюкозы.

Техника постановки теста:

1. Колонию исследуемого микроорганизма снимают бактериальной петлей с плотной среды и переносят в пробирку с 5 мл среды Кларка. Посевы инкубируют двое суток при 36(±1)°С. В случаях нечеткого роста реакцию ставят с 4-5-дневными культурами, выдержанными при температуре 22 °С.

2. В стерильную пробирку вносят 1 мл среды Кларка с исследуемой 2(5)-су-точной культурой. К бактериальной взвеси добавляют 0,6 мл 5% спиртового раствора α-нафтола. Содержимое пробирки тщательно перемешивают. В приготовленную смесь добавляют 0,2 мл 40% раствора гидроксида калия.

Соблюдать указанный порядок внесения реактивов!

После внесения всех ингредиентов содержимое пробирок не менее 30 с осторожно встряхивают для лучшего доступа кислорода воздуха и на 15 мин ставят в штатив для последующего учета результатов реакции.

В щелочной среде в присутствии катализатора а-нафтола ацетоин (СН3СО-СН(ОН)-СН3) — один из конечных метаболитов реакции окисляется до диацетила (СН3-СО-СО-СН3), который вступает в реакцию с аргинином и другими азотистыми основаниями пептона, образуя при этом азотсодержащие комплексы вишнево-красного цвета. Интенсивность окраски среды определяется концентрацией содержащегося в ней ацетоина.

Учет результатов. Положительный результат реакции характеризуется появлением ярко-розового или вишнево-красного окрашивания среды. При отрицательном результате окрашивания среды не происходит.

Положительный контроль: Enterobacter aerogenes, Serratia marcescens.

Отрицательный контроль: Escherichia coli.

Примечание. При выдерживании посевов в термостате при температуре 36(±1) °С в течение 3 сут и дольше ацетоинобразующие культуры создают в бульоне слабокислую реакцию, которая может быть оценена как слабоположительная или ложноотрицательная реакция.

Углеводы для дифференциальной диагностики и идентификации различных микроорганизмов

- Читать далее "Тест на гидролиз эскулина в идентификации микроорганизмов"

Редактор: Искандер Милевски. Дата публикации: 27.05.2019

Оглавление темы "Бактериологический метод исследования.":
  1. Тест на гидролиз крахмала в идентификации микроорганизмов
  2. Тест окисления — брожения (тест OF) в идентификации микроорганизмов
  3. Тест ONPG (тест на β-галактозидазу с о-нитрофенил-β-D-галактопиранозидом, ONPG) в идентификации микроорганизмов
  4. Тест на определение кислотообразования в реакции с метиленовым красным (MR-тест) в идентификации микроорганизмов
  5. Тест на образование ацетилметилкарбинола (реакция Фогес-Проскауэра [VP] в модификации Баррита)
  6. Тест на гидролиз эскулина в идентификации микроорганизмов
  7. Тест на утилизацию цитрата на среде Симмонса в идентификации микроорганизмов
  8. Тест на утилизацию цитрата на среде Кристенсена в идентификации микроорганизмов
  9. Тест на утилизацию органических кислот или их солей
  10. Тест на утилизацию малоната в идентификации микроорганизмов

Остались вопросы или замечания?

Все размещенные статьи преследуют образовательную цель и предназначены для лиц имеющих базовые знания в области медицины.
Без консультации лечащего врача нельзя применять на практике любой изложенный в статье факт.
Жалобы и возникшие вопросы просим присылать на адрес statii@dommedika.com
На этот же адрес ждем запросы на координаты авторов статей - быстро их предоставим.