В микробиологической практике этот тест применяют для дифференциальной диагностики энтеробактерий и родственных им микроорганизмов.

Тест основан на использовании среды Симмонса, которая в качестве единственного источника углерода содержит цитрат натрия. В связи с этим среда может быть использована только для культивирования тех микроорганизмов, которые продуцируют фермент цитратазу. Входящие в состав среды ионы магния активируют действие фермента.

Под действием вегетирующих в среде микробов цитрат натрия расщепляется до диоксида углерода (СO₂), образующего в водном растворе с ионами натрия карбонат натрия (Na₂CO₃), а затем гидрокарбонат натрия (NaHCO₃). Параллельно происходит расщепление солей аммония до аммиака (NH₃). Образующиеся продукты создают щелочную реакцию со смещением pH в щелочную сторону и соответствующим изменением цвета индикатора.

В результате происходящих метаболических реакций, обусловленных вегетирующими микроорганизмами, оливковый цвет среды переходит в ярко-синий (индикатор бромтимоловый синий). Бактерии, не продуцирующие цитратазу и не имеющие возможности утилизировать цитрат как источник углерода, на среде Симмонса не растут и цвет среды не изменяют.

Техника постановки теста. Испытуемую 18-часовую культуру засевают штрихом на скошенную поверхность среды Симмонса. Засеянные среды инкубируют 24-48 ч при температуре 36(±1)°С. Показателем наступившей реакции является приобретение питательной средой ярко-синего цвета. В отдельных случаях время инкубации увеличивают до 5-7 сут.

Положительный контроль: Morganella morganii, Enterobacter cloaceae.

Отрицательный контроль: Escherichia coli.

- Читать далее "Тест на утилизацию цитрата на среде Кристенсена в идентификации микроорганизмов"

Редактор: Искандер Милевски. Дата публикации: 27.05.2019