Тест на утилизацию органических кислот или их солей

Тест на утилизацию органических кислот или их солей с участием специфических ферментов используется в бактериологической диагностике кишечных инфекций, в частности для идентификации некоторых видов сальмонелл.

Тест основан на посеве испытуемых микроорганизмов на комплекс сред, основой белкового питательного субстрата в которых является пептон, а единственным источником углерода — растворимые соли тартрата (винной кислоты, растворимого винного камня), муката (галактаровой, слизевой кислот) и цитраты (соли лимонной кислоты). Поэтому произрастать на них способны только те виды бактерий, которые продуцируют ферменты, способные гидролизовать эти соединения, превращая их в доступные для ассимиляции углерода химические вещества.

Проявлением происходящего в среде гидролиза органических кислот является смещение pH в кислую сторону с изменением цвета питательной среды соответственно цвету введенного в нее индикатора.

Техника постановки теста. 18-часовую культуру микроорганизма, снятую с плотной питательной среды, засевают бактериальной петлей с солями тартрата, слизевой кислоты и натрия цитрата. Посевы инкубируют в термостате 24-48 ч при температуре 36(±1) °С. Одновременно с засеянными пробирками в термостат помещают контрольные — незасеянные пробирки с используемой в опыте стерильной средой.

Учет результатов теста проводят обычно в течение первых 48 ч при обнаружении изменения цвета среды в опытных пробирках. Среда синего с зеленоватым оттенком цвета в момент посева (индикатор бромтимоловый синий) при утилизации тартрата, слизевой кислоты или цитрата вследствие их гидролиза и накопления кислых продуктов расщепления приобретает оливковый или желто-зеленый цвет.

После окончания инкубации с пробирками, содержащими среду с D-тартратом, давшими положительный результат, проводят дополнительный тест: в контрольную незасеянную среду и в опытные пробирки (положительный и отрицательный результаты теста) приливают 0,5 мл нейтрального 50% раствора уксусно-кислого свинца (СН3СОО)2Pb*3Н2O. В контрольной пробирке и в пробирке с отрицательным результатом реакции появляется осадок, занимающий более 2/3 объема среды. В пробирке с положительным результатом теста отмечается значительно меньшее количество осадка.

Положительный контроль:
на тартрат — Citrobacter freundii; на мукат — Enterobacter aerogenes; на цитрат — Enterobacter cloacae.

Отрицательный контроль:
на тартрат — Enterobacter cancerogenus; на мукат — Hafnia alvei; на цитрат — Shigella sonnei.

- Читать далее "Тест на утилизацию малоната в идентификации микроорганизмов"

Редактор: Искандер Милевски. Дата публикации: 27.05.2019

Оглавление темы "Бактериологический метод исследования.":
  1. Тест на гидролиз крахмала в идентификации микроорганизмов
  2. Тест окисления — брожения (тест OF) в идентификации микроорганизмов
  3. Тест ONPG (тест на β-галактозидазу с о-нитрофенил-β-D-галактопиранозидом, ONPG) в идентификации микроорганизмов
  4. Тест на определение кислотообразования в реакции с метиленовым красным (MR-тест) в идентификации микроорганизмов
  5. Тест на образование ацетилметилкарбинола (реакция Фогес-Проскауэра [VP] в модификации Баррита)
  6. Тест на гидролиз эскулина в идентификации микроорганизмов
  7. Тест на утилизацию цитрата на среде Симмонса в идентификации микроорганизмов
  8. Тест на утилизацию цитрата на среде Кристенсена в идентификации микроорганизмов
  9. Тест на утилизацию органических кислот или их солей
  10. Тест на утилизацию малоната в идентификации микроорганизмов

Остались вопросы или замечания?

Все размещенные статьи преследуют образовательную цель и предназначены для лиц имеющих базовые знания в области медицины.
Без консультации лечащего врача нельзя применять на практике любой изложенный в статье факт.
Жалобы и возникшие вопросы просим присылать на адрес statii@dommedika.com
На этот же адрес ждем запросы на координаты авторов статей - быстро их предоставим.