Для определения гемолитической активности бактерий используют дефибринированную кровь барана, лошади, кролика, донора.

Для получения дефибринированной крови 30-50 мл стерильно взятой шприцем из вены крови асептично вносят в стерильный флакон, содержащий стеклянные бусы, и быстро перемешивают до образования сероватых сгустков фибрина, осевших на дно вместе с бусами. Кровь хранят в холодильнике не более 5 дней.

а) Кровяной агар для определения гемолиза. К 100,0 мл растопленного и остуженного до 45-50°С 2%-ного питательного агара с pH 7,5±0,1, соблюдая правила асептики, добавляют 5,0 мл стерильной дефибринированной крови: кроличьей, лошадиной, бараньей или человеческой, не содержащей консервантов или антибактериальных препаратов. Смесь тщательно перемешивают, остерегаясь образования пены, и разливают в стерильные чашки Петри, предварительно подогретые в термостате.

Перед розливом чашки устанавливают на ровную поверхность. Слой агара должен быть не более 4,0 мм, одинаковым по всей площади чашки.

б) Основа кровяного агара № 2, HiMedia, Blood Agar № 2. Среда создает максимально благоприятные условия для роста требовательных микроорганизмов и выявления их гемолитической активности.

Состав, г/л:
Пептон протеозный — 15,0
Вытяжка печеночная — 2,5
Экстракт дрожжевой — 5,0
Натрия хлорид — 5,0
Агар — 15,0
pH 7,4±0,2

Суспендируют 42,5 г смеси в 1000,0 мл дистиллированной воды. Нагревают до полного растворения. Устанавливают pH при необходимости. Стерилизуют автоклавированием 15 мин при температуре 121°С. Охлаждают до 45-50°С. Стерильно добавляют 7% стерильной крови барана, кролика, лошади или человека (без консервантов).

Основа кровяного агара № 2 усиливает гемолитическую активность требовательных гемолитических микроорганизмов, таких как стрептококки, пневмококки. На средах с добавлением 10% гемолизированной бараньей крови можно выращивать Haemophilus spp.

- Читать далее "Питательные среды для определения чувствительности микроорганизмов к антибиотикам"

Редактор: Искандер Милевски. Дата публикации: 25.2.2020