а) Питательные основы для кровяных сред и для гемокультур Бульон Тодда-Хьюитта. Измельчают бычье сердце и на каждые 450,0 г фарша добавляют по 1000,0 мл дистиллированной воды. Оставляют на ночь при температуре 4°С. Настой нагревают до 80°С и выдерживают при этой температуре 30 мин, периодически помешивая. Горячий мясной настой фильтруют через фильтровальную бумагу или вату. Потерю жидкости за счет испарения и фильтрации восполняют дистиллированной водой.

На каждый литр настоя добавляют по 20,0 г пептона и доводят pH гидроксидом натрия NaOH (1 ммоль/л, т.е. примерно 3,0 мл на 1 л смеси). На каждый литр среды добавляют 2,0 г натрия бикарбоната NaHCO₃, 2,0 г натрия хлорида и 1,0 г натрия гидроортофосфата NaHPO₄*2H₂O).

Кипятят среду 15 мин. Горячую среду фильтруют через фильтровальную бумагу. Доводят pH до 7,8±0,2, разливают среду по флаконам и стерилизуют при 115°С 10 мин. Хранят в холодильнике.

б) Бульон Тодда-Хьюитта (для гемокультур стрептококка и пневмококка), сухой HiMedia, Todd-Hewitt Broth. Бульон Тодда-Хьюитта рекомендован для выделения гемолитического стрептококка группы А и последующего серологического типирования.

Состав, г/л:
Вытяжка говяжьего сердца — 500,0
Пептон — 20,0
Декстроза — 2,0
Натрия хлорид — 2,0
Натрия ортофосфат — 0,4
Натрия карбонат — 2,5
pH 7,8±0,2

Суспендируют 37,0 г сухой среды в 1000,0 мл дистиллированной воды. Кипятят до полного растворения. Стерилизуют при 121°С 10 мин.

Среда хорошо забуферена посредством добавления фосфата и карбоната натрия, которые нейтрализуют кислоты, образующиеся при ферментации декстрозы.

в) Триптиказосоевый агар, сухой HiMedia Tripticase-Soy Agar.

Состав:
Панкреатический гидролизат казеина — 15,0 г
Папаиновый гидролизат соевых бобов — 5,0 г
Натрия хлорид — 5,0 г
Агар — 15,0 г
Дистиллированная вода — 1000,0 мл
pH 7,3±0,2

Навеску порошка, указанную на этикетке, растворяют в 1000,0 теплой воды, доводят до кипения при полном растворении порошка. Устанавливают pH, разливают по флаконам, стерилизуют при 121°С 15 мин.

Для приготовления кровяного агара среду расплавляют, остужают до 45-50°С, асептически вносят в нее 5-10% стерильной дефибринированной крови барана, лошади или кролика, перемешивают, разливают по чашкам Петри или пробиркам (для получения скошенного агара).

- Читать далее "Среды для гемокультур"

Редактор: Искандер Милевски. Дата публикации: 25.2.2020