Присутствие вирусных генов в трансформированных клетках может быть обнаружено в опытах по «спасению» вируса, а также путем выявления вирусной ДНК или вирусных мРНК н вирус-специфических белков.

Спасение инфекционного вируса: SV40. Подавляющее большинство клеточных линий, трансформированных SV40, не содержит даже следов инфекционного вируса или инфекционной вирусной ДНК (Сэбин и Кох, 1963b; Кит и др., 1968). Попытки индуцировать размножение вируса физическими и химическими методами (например, путем обработки митомицииом С, профлавином, Н202, аминокислотным голоданием, рентгеновскими лучами) обычно заканчиваются неудачей или приводят к освобождению минимальных .количеств вируса (КН—10~3 БОЕ на 1 клетку) (Сэбин и Кох, 1963b; Джербер, 1964; Берне и Блэк, 1968, 1969; Ротшилд и Блэк, 1970; Каплан и др., 1972).

Однако если клетки, трансформированные SV40, культивировать вместе с пермиссивными клетками, то вирус обнаруживается уже через день или два (Джербер и Киршстайн, 1962; Сэбин и Кох, 1963b). Контакт между двумя типами клеток обязателен (Джербер, 1966), а урожай вируса всегда низкий. Чувствительность системы может быть повышена, если с помощью инактивированного вируса Сен-дай вызвать слияние трансформированных и индикаторных клеток в гетерокарионы (Копровский и др., 1967; Уоткинс и Дульбекко, 1967; Турнье и др., 1967) или если трансформированные клетки перед их слиянием с пермиссивными клетками обработать аналогами оснований (см. обзор Уоткинса, 1971а).

Хотя эффективность «спасения» варьирует от клона к клону, вирус всегда может быть выделен из всех производных одной и той же линии (Уоткинс и Дульбекко, 1967; Дабси др., 1967), что указывает на присутствие по меньшей мере одного полного генома SV40 в каждой клетке популяции. Некоторые линии клеток, трансформированных SV40, продуцируют вирус очень редко или совсем не продуцируют его, несмотря на присутствие в клетках вирусной ДНК и Т-антигена.

Это скорее всего объясняется тем, что непродуцирующие клетки были трансформированы дефектными мутантами вируса (Дабе и Кит, 1968). «Спасение» вируса из клеток, трансформированных при низкой и при высокой множественности заражения, происходит примерно с одинаковой эффективностью (Кит и Браун, 1969); по-видимому, корреляция между числом вирусных геномов в трансформированных клетках и вероятностью «спасения» вируса отсутствует.

Вирус, выделяемый из трансформированных клеток, в основном идентичен исходному трансформирующему вирусу (Турнье и др., 1967; Такемото и др., 1968); правда, имеется одно сообщение, в котором утверждается, что «спасенный» вирус трансформирует клетки более эффективно, чем исходный (Тодаро и Такемото, 1969). Механизм «спасения» вируса, происходящего при слиянии клеток, неизвестен.

Предположительно он включает вырезание вирусного генома из места его интеграции и последующее размножение вируса в пермиссивных условиях, обусловленных вхождением клетки обезьяны в состав гетерокариона.

«Спасение» инфекционного вируса: вирус полиомы. Отдельные линии клеток, трансформированных вирусом полиомы, в виде исключения способны образовывать вирус под влиянием физических и химических воздействий (Фогель и Сакс, 1969, 1970); однако подавляющее большинство таких линий никогда не продуцирует вируса, даже если они подвергаются обработкам, столь успешным в случае SV40.

Наиболее правдоподобное объяснение различного поведения двух вирусов заключается в том, что клетки, обычно используемые для трансформации вирусом полиомы, являются частично пермиссивными; поэтому, чтобы клетка выжила, трансформация должна быть вызвана мутантом вируса, дефектным по способности к размножению. Хотя вирус полиомы и не может быть «спасен», ниже будут представлены доказательства того, что вирусные гены постоянно присутствуют в трансформированных клетках.

- Читать далее "Обнаружение вирусной ДНК с помощью гибридизации. Транскрипция вирусных генов"