а) Среда цветная дифференциальная сухая (Иркутский НИПЧИ Сибири и Дальнего Востока). Состав:
Панкреатический гидролизат казеина — 8,0 г
Натрия хлорид — 3,0 г
Натрия фосфат двузамещенный — 0,96 г
Глюкоза — 0,96 г
Лактоза — 9,6 г
Мочевина — 4,8 г
Фуксин кислый — 0,09 г
Бромтимоловый синий — 0,09 г
Агар — 8,65 г
Вода дистиллированная — 1000,0 мл
pH 7,1 ±0,1

36.0 г порошка размешивают в 1 л дистиллированной воды, доводят до кипения, кипятят до полного растворения агара (3—5 мин), фильтруют через ватно-марлевый фильтр, разливают в стерильные пробирки, трехкратно автоклавируют текучим паром в течение 30 мин. Среду скашивают так, чтобы поверхность скошенной части была в два раза больше высоты столбика.

б) Среда для изучения подвижности микробов, сухая (Иркутский НИПЧИ Сибири и Дальнего Востока). Состав:
Панкреатический гидролизат казеина — 4,0 г
Натрия хлорид — 4,0
Натрия фосфат двузамещенный — 1,0 г
Агар — 4,0 г
Вода дистиллированная — 1000,0
pH 7,1 ±0,1

13.0 г порошка размешивают в 1 л дистиллированной воды, доводят до кипения, кипятят до полного расплавления агара (2-3 мин), фильтруют через ватно-марлевый фильтр, разливают в пробирки и автоклавируют в течение 20 мин при давлении 1 атм (121°С).

Среда предназначена для изучения характера роста и подвижности возбудителя чумы. Культура возбудителя чумы растет по уколу, не вызывая помутнения среды.

Подвижные культуры возбудителя псевдотуберкулеза дают легкое помутнение среды в виде вуали.

в) Агар Кристенсена для выявления уреазы. К 1000,0 мл дистиллированной воды добавляют 1,0 г сухого пептона, 5,0 г поваренной соли, 20,2 г мелко изрезанного агара и 1,0 г глюкозы.

Эту смесь кипятят до полного растворения агара, доливая при выкипании до первоначального объема горячую дистиллированную воду, после чего устанавливают pH 6,8. К агару с установленной и проверенной реакцией прибавляют 0,012 г фенолового красного индикатора, растворенного в 1 мл 96%-ного спирта, хорошо размешивают, фильтруют (не давая агару застыть) через ватно-марлевый фильтр, разливают в пробирки по 5,0 мл и стерилизуют 20 мин при 121°С.

При правильно установленной pH агар в пробирках приобретает апельсиновый цвет. После стерилизации, когда агар остынет до 50°С, в каждую пробирку прибавляют стерильно 0,5 мл 20%-ного раствора мочевины па бидистиллированной воде и среду скашивают. После добавления мочевины цвет агара бледнеет и приобретает желтоватый оттенок.

Раствор мочевины для среды Кристенсена готовят следующим образом: 20,0 г мочевины растворяют в стерильной бидистиллированной воде и кипятят на водяной бане в течение 30 мин с момента закипания.

Штаммы возбудителя чумы не ферментируют мочевину и не изменяют цвета среды, в отличие от возбудителя псевдотуберкулеза.

- Читать далее "Препараты стимулирующие рост возбудителя чумы"

Редактор: Искандер Милевски. Дата публикации: 2.3.2020